大腸菌から高純度mRNAまでのmRNAの一貫生産プロセス
In vitro転写(IVT)は、mRNAワクチンの製造に使用される酵素プロセスです。生物学的発酵プロセスとは異なり、直線化されたプラスミドDNAが必要です。この線形アイソフォームは、開放環状でスーパーコイル化されたpDNAからの制限酵素によって生成されます。しかし、従来のpDNA製造プロセスでは、直鎖状および開放環状のアイソフォームが除去され、生産収率が低下します。
この動画では、ザルトリウス傘下のBIA Separations担当マネージングディレクターであるAleš Štrancarが、pDNAとmRNAを単一の製造プロセスとして扱うことについて語ります。大腸菌からmRNA産生まで、回収率の向上、極めて低いタンパク質不純物、効率的なdsRNA除去につながるこの新しい精製アプローチについてご紹介します。
【主な学習内容】
- 大腸菌由来原料から mRNA 産生に至る新しい精製アプローチの検討
― 回収率の向上、極めて低いタンパク質不純物レベル、ならびに非常に効率的な dsRNA 除去の実現 - IVT 反応の迅速な解析手法の導入とその影響
― 最適化された反応条件や転写効率（コピー数）改善を含む検討 - pDNA 直線化における最適化条件の活用による精製プロセスの向上
― タンパク質コンタミネーションの最小化、精製効率の向上、ならびに凝集体形成の防止
専門家の紹介
アレス・ストランカー
常務取締役 |BIAセパレーション
Ales Strancarは、ザルトリウス傘下のBIA Separationsのマネージングディレクターであり、新世代のクロマトグラフィーサポートであるCIMの主要発明者の1人(対流相互作用媒体)です。分離および精製技術を扱う60以上の科学論文を執筆/共著しています。彼は、生体分子の分離と精製において5つの米国特許と同等の外国特許の共著者です。また、生体分子分離のための新しいクロマトグラフィー技術を扱った書籍の章をいくつか執筆しています。