疎水性相互作用クロマトグラフィー(HIC)

現代のバイオ医薬品製造プロセスには、より高い精度と運用効率が求められています。

HICは、分子表面の疎水性に基づいて分離を行うことで、これらの要件を満たすうえで重要な役割を果たします。ダウンストリーム精製において広く用いられているHICは、分離分解能を高めるとともに、イオン交換クロマトグラフィー(IEX)やアフィニティクロマトグラフィーなどの他の手法を補完します。HICは、タンパク質の結合を促進するために高塩濃度条件を必要とすることから、タンパク質が高塩バッファーで溶出されるIEXなどの工程の後段での使用に特に適しています。

ザルトリウスは、アプリケーションごとの特定のニーズに対応するために設計された、樹脂、メンブレン、モノリスを含む包括的なHICソリューションのポートフォリオを提供しています。

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ザルトリウスの疎水性相互作用クロマトグラフィー(HIC)ポートフォリオ

HICプロセスに最適なソリューションを見つける

HICは、その卓越した性能により、主に骨材除去に使用される強力なツールです。ザルトリウスは、樹脂、メンブレン、モノリスにまたがる汎用性の高いHICソリューションを提供し、多様な精製ニーズに対応しています。

 

メンブレンは、ウイルス、VLP、その他の大型複合体に対して高い結合容量を発揮するとともに、高流量運転を可能にすることで、処理時間の短縮と生産性の向上に貢献します。

 

 

Sartobind® フェニル
リガンドフェニル (R-NH-C₆H₅)
ベースマトリクスセルロース
主要アプリケーション
  • 骨材の除去
  • 宿主細胞タンパク質
  • ウィルス
  • エンドトキシン
  • 脂質、染料、洗剤、消泡剤
  • 溶出クロマトグラフィーリガンド
 

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樹脂は中小サイズのタンパク質に対して強力な結合能を提供し、混合モード樹脂はHICとIEXの機能を組み合わせて選択性を高めます。

 

 Methyl Ceramic Hyper DSDR Hyper D®
リガンドMethyl-CH3C 11
ベースマトリクスセラミックビーズシリカビーズ
代表的なアプリケーション
  • 非常に疎水性の高い標的分子または不純物用
  • 中間精製としてのタンパク質のキャプチャー
  • 溶剤および界面活性剤の結合、分子(TnBP & Triton X-100)
 

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疎水性相互作用クロマトグラフィー(HIC)に最適な方法

疎水性相互作用クロマトグラフィー(HIC)は核酸分離に必須です。モノリスクロマトグラフィーの利点と組み合わせることで、HICはこのニーズを満たすと同時に、アデノ随伴ウイルス(AAV)を含む高分子量生体分子の精製のための優れたソリューションを提供します。

 

 CIMmultus® OHCIMmultus® C4-HLD
チャンネルサイズ1.3、2、6 μm2, 6 μm
カラム容量1 mL – 8 L1 mL – 8 L
使用可能pH範囲2 – 102 – 10
機能弱い疎水性強い疎水性
代表的なアプリケーションウイルス(AAV)など、ウイルス様粒子(VLP)核酸(pDNA、mRNA)
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CIMmultus® OH

  • 無電荷(中性)リガンド
  • 使用可能pH範囲:2–10
  • 沈殿塩またはポリエチレングリコールの存在下における、非常に大型の溶質(ウイルス粒子、ウイルス様粒子、ベシクル)の保持
  • 大型溶質を、サイズが小さいものから順に高分離能で溶出
  • 塩濃度またはポリエチレングリコール濃度の低下による溶出
  • 1 M NaOHによるサニタイズが可能

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CIMmultus® C4-HLD

  • 強疎水性(無電荷)リガンド
  • 使用可能pH範囲:2–10
  • 核酸(pDNA、RNA)からのタンパク質除去において極めて高い有効性

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多様なバイオ医薬品製造プロセスのニーズに応える高精度な精製

ザルトリウスは、現代のバイオ医薬品製造プロセスにおける進化する要求事項を支援するため、幅広く柔軟な HIC ツールのポートフォリオを提供しています。凝集体、複雑なウイルス粒子、プラスミドアイソフォームなど、分離対象を問わず、最適な性能を発揮するよう設計された HIC 樹脂、メンブレン、モノリスを取り揃えています。

これらのソリューションは、高い結合容量と高流速に加え、混合モードや耐塩性オプションを含む高度な選択性を備えており、幅広い分子サイズに対応したスケーラブルな精製を実現します。本ポートフォリオは、精度と適応性を重視し、アプリケーションごとのプロセス開発を支援するよう設計されています。

よくあるご質問

HICは、タンパク質やその他の生体分子を、それぞれの表面の疎水性の違いに基づいて分離するクロマトグラフィー技術です。タンパク質の生物活性を維持したまま分離 | 精製できる点が特長です。

HICの基本的なプロセスは、イオン交換クロマトグラフィーや混合モードクロマトグラフィーなどと同様で、平衡化、試料適用および洗浄、溶出、再生の4つの主要な段階から構成されます。

分離は、移動相中の塩濃度を段階的に低下させる塩勾配を用いて行われます。塩濃度が低下すると、固定相と分子の間に働く疎水性相互作用が弱まり、分子はその疎水性の強さに応じてカラムから順に溶出します。

従来の HIC カラムとは異なり、Sartobind® Phenyl メンブレンは、対流輸送による高速処理を可能にします。また、バッファー消費量が少なく、シングルユース形式によりスケールアップも容易です。さらに、カラム充填を必要としません。

Sartobind® Phenyl は、イオン交換クロマトグラフィーやプロテインAだけでは十分な分離が得られない場合に、疎水性の高いモノクローナル抗体(mAb)の凝集体や誤って折り畳まれた分子種を除去するためのポリッシングツールとして機能します。

結合には通常、中程度から高い塩濃度(例:1~2 M の硫酸アンモニウム)が必要です。ただし、Sartobind® Phenyl は幅広い耐塩性をサポートしており、広い導電率範囲にわたって良好な結合特性を示します。

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