バイオ医薬品のシームレスな研究、開発、製造のためのトランスフェクション試薬
ザルトリウスのトランスフェクション試薬は一過性トランスフェクション用に厳密に設計されており、細胞および遺伝子治療(CGT)用のウイルスベクター製造、タンパク質製造、ライフサイエンス研究など幅広いアプリケーションに活用できます。
これらの即使用可能なトランスフェクション試薬には予め最適化したプロトコールが添付し、高いトランスフェクション効率、秀逸な細胞生存率、および増強されたウイルスベクター価を実現します。医薬品GMPグレードのザルトリウスのソリューションは、バイオテクノロジー企業、製薬企業、ならびに受託機関それぞれの固有のニーズに対応し、研究開発から製造に至るまでのプロジェクトを、比類のない品質と信頼性で一貫してサポートします。
ザルトリウスのトランスフェクション試薬
研究から商用化までをサポートする弊社の最高水準の製品とサービスをご紹介します。
細胞および遺伝子治療(CGT)用ウイルスベクター
高品質なトランスフェクション試薬の使用は、遺伝子細胞治療用ウイルスベクターの製造において極めて重要であり、プロセスの経済性と大規模生産でのスケーラビリティを大幅に向上させます。 AAVおよびLV製造における高い生産性はバッチあたりの投与量の増加をもたらし、コスト削減および治療へのアクセス向上をもたらします。
大規模製造用に設計されたFectoVIR®-AAVおよびFectoVIR®-LVは、低複合化容量、長期安定性、高再現性を実現し、引き続き入手可能な業界標準のPEIpro®と比較してより効率的かつ安定した結果を保証します。ICH Q7ガイドライン準拠で製造され、包括的な規制当局向け文書で裏付けられたザルトリウスのGMPグレードトランスフェクション試薬は、コンプライアンスおよび品質保証を強化します。さらに残留物PEIpro®およびFectoVIR®-AAV®の検出に対する毒性データおよび特定のGMP準拠UHPLC法によりリスク低減策が強化され、患者の安全性を担保しています。
タンパク質製造
遺伝子組換えタンパク質やモノクローナル抗体の一過性発現は、細胞内における対象タンパク質の挙動を研究する上で重要な工程であり、治療研究の初期段階における候補タンパク質のスクリーニングを可能にし、さらに多くのアプリケーション領域において分子メカニズムの調節を実現します。
ザルトリウスの目標はタンパク質産生プロセスを効率化することであり、研究者の方々がタンパク質発現に関する従来の煩雑さから解放され、科学的課題に集中することを実現することです。この目標を達成するため、弊社は哺乳類細胞における一過性タンパク質産生に特化したトランスフェクション試薬FectoPRO®を開発しました。FectoPRO®はHEK-293およびCHO細胞株における効率的なタンパク質産生に特化した即使用可能で費用対効果の高いソリューションを提供し、研究ニーズに沿った円滑かつ効果的なワークフローを実現します。
ライフサイエンス研究
主な哺乳類初代細胞および細胞株に適した、すぐに使用可能なトランスフェクション試薬や、off-the-shelfプラスミドを含む、研究者向けの幅広いライフサイエンス向けデリバリーソリューションをご覧ください。
これらの製品により、以下のアプローチに基づいて研究を円滑に進めることを可能にします:
- 注目するタンパク質の機能やシグナル伝達経路における役割の解析、プラスミドベースまたはRNAベースの実証済み手法によるゲノム編集、さらに哺乳類細胞においてガイドRNAの導入およびCas9タンパク質の発現を行うための、コスト効率の高いRNA干渉までを可能にする、業界最高水準のトランスフェクション試薬のラインアップ
- カスタマイズしたトランスフェクション ソリューション:ザルトリウスの特色ある試薬ラインナップから、標的遺伝子発現解析、ゲノム編集、RNA干渉研究向けにjetPRIME®、INTERFERin® などを選択できます。サンプルをご請求いただくことで、実験の最適化や評価段階での支援など、ザルトリウスからのサポートをご利用いただけます。
サポートのご案内
試薬の試験成績書(CoA)はどこで入手できますか?
すべての製品の試験成績書は、My Sartoriusポータルでご確認いただけます。ポータルにアクセスするにはアカウントをご作成ください。
トランスフェクションのトラブルシューティング
トランスフェクションの開始からプラスミドDNAコンストラクトの変更、新しい細胞株または単離した初代細胞を用いた作業に至るまでプロトコールの微調整が必要となる場合があります。ザルトリウスのトランスフェクション専門家が常時サポートします。
トランスフェクションの「だれが」「なぜ」「どのように」
in vitroおよびin vivoで真核細胞の遺伝子発現を調節する有力な手法として、研究者はトランスフェクションを重要視しています。大学または研究機関の研究者からバイオテクノロジー企業または製薬企業の技術者に至るまで、トランスフェクションは幅広く利用されています。
トランスフェクションとは、外因性核酸が細胞膜を透過して細胞内に侵入することを可能にするプロセスを指します。一般的に使用される外因性核酸は、プラスミドDNA、RNA、siRNA、およびオリゴヌクレオチドです。細胞内に導入された核酸は、目的遺伝子の過剰発現またはサイレンシングを誘導することで遺伝子発現を調節します。
目的遺伝子の役割解明(遺伝子研究、ハイスループットスクリーニング)から抗体などの生物学的製剤(タンパク質産生)および遺伝子・細胞治療用の遺伝子組換えウイルス粒子(遺伝子・細胞治療用ウイルス産生)の製造に至るまで、遺伝子過剰発現は様々なアプリケーションに不可欠な手法です。
遺伝子サイレンシングは、目的遺伝子の発現を抑制するために用いられる手法です。目的遺伝子の発現は部分的に抑制(遺伝子ノックダウン)されるか、完全に阻害(遺伝子ノックアウト)されます。あらゆる遺伝子が標的となり得るため遺伝子サイレンシングは、単一遺伝子疾患、がん、および免疫治療戦略に関連する遺伝子ベースの治療法を開発するために広く用いられている手法です。
核酸のトランスフェクションは、特定の単一または複数遺伝子を過剰発現またはサイレンシングすることにより、細胞を一過性または安定的に改変するために用いられます。
トランスフェクションにはいくつかの方法があり、化学的方法および物理的方法の2つの異なるカテゴリーに一般に分類されます。物理的方法には電気穿孔法、超音波穿孔法、マイクロインジェクションなどがありますが、これらのプロセスは複雑で哺乳類細胞に対して比較的毒性を示します。
これらの問題を解決するため、化学物質を用いたトランスフェクションは、利点として使いやすさ、高いトランスフェクション効率、卓越した細胞生存率を持ち、最適な代替方法となります。化学物質を用いたトランスフェクションは、陰イオン性の核酸を保護するカチオン性ポリマーまたは脂質を用いて通常行われます。
- トランスフェクション試薬による遺伝物質のカプセル化
核酸はポリリン酸骨格により陰イオン性であり、陽イオン性のトランスフェクション試薬(ポリマーまたは脂質)と相互作用することが可能です。その結果、トランスフェクション複合体またはナノ粒子を形成し、ヌクレアーゼによる分解から核酸を保護します。 - ナノ粒子の細胞内取り込み
ほとんどの細胞は、細胞膜の外部表面に負に帯電したヘパラン硫酸プロテオグリカンを発現しており、正に帯電したトランスフェクション複合体はこれと相互作用することができます。この相互作用は、エンドサイトーシスプロセスを介した細胞内取り込みを引き起こす鍵となります。 - 細胞質への放出および必要に応じた核内輸送による転写
細胞内への取り込み後、トランスフェクション複合体は細胞内小胞内に取り込まれます。ザルトリウスのトランスフェクション試薬は、小胞膜の破裂または融合を通じて核酸を細胞質内に放出させることが可能です。ほとんどの核酸(オリゴヌクレオチド、siRNA、mRNAなど)は、活性化した状態で細胞質内に留まります。遺伝子導入の場合、プラスミドDNAは核内へ輸送され、一過性の発現が行われます。その後、ゲノムへの組み込みにより恒常的な発現(安定発現)となる可能性があります。