細胞株特性解析

セルバンキングのプロセスは、マスターセルバンク（MCB）の製造に研究用セルバンク（RCB）を導入することから始まります。

これを実現するためには、RCBが少なくとも無菌性、マイコプラズマフリー、およびアイデンティティーが保証されていることが認証されなければなりません。さらに、製造元から、潜在的なウイルス汚染物質に対する広域スペクトルの細胞ベースのin vitro試験の実施が要求される場合があります。

RCBのリリースを迅速化するため、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）による迅速検査、暫定的なin vitro戦略、DNAバーコーディングによるアイデンティティー検査などの選択肢がございます。

作業用セルバンク（WCB）はマスターセルバンク（MCB）から調製されます。WCBの安全性試験要件は、MCBに対して実施された試験レベルに依存します。

MCBに対して既に詳細な特性解析が完了している場合、WCBに対する試験は最小限で済みます。規制当局によって異なりますが、通常はアイデンティティー、安定性、微生物によるコンタミネーションの評価に限定されます。ウイルス試験は、認識されたリスクが発生する場合にのみ推奨されます。

遺伝的安定性の特性解析を行うには、サザンブロッティング法、mRNAの配列、および／またはトランスジーンコピー数の測定などの技術を用いてトランスジーンを評価します。アイデンティティーはDNAバーコーディングを用いて測定可能です。微生物の存在は、無菌性試験、マイコプラズマ試験、およびマイコバクテリウムアッセイを用いて判定します。

異なる種由来の作業用セルバンクを特性解析するために用いられる試験方法には、以下のものが含まれます：

• 無菌試験
• マイコプラズマ試験
• in vitroアッセイ

遺伝子安定性アッセイは、以下の方法を用いて実施することが可能です：

• 核酸配列決定
• サザンブロット法
• アイデンティティー試験
• 遺伝子コピー数

製造終了時セルバンク（EoPCB）は、生産後セルバンク（PPCB）またはin vitro培養限界セルとも呼ばれることがあります。これらの細胞は製造システムのバリデーションのために試験されます。これにより、細胞の安定性とシステム内のコンタミネーション問題がないことが保証されます。

EoPCBのサンプリング時期は製品によって異なり、個別に実施されます。

タンパク質ベースの治療薬製造に使用される細胞株の場合、試験要件は二つの側面から構成されます。すなわち、安定性試験とコンタミネーション（バイオセーフティ）試験が含まれます。一方、ウイルス性ワクチンやウイルスベクターに使用される細胞株の試験計画では、マスター細胞バンク（MCB）の生成プロセスによっては、同様の遺伝的安定性評価が要求されない場合もあります。

EoPBC（最終製品用親株）の要件は、マスターセルバンク（MCB）の要件と非常に類似しております。EoPBCには遺伝的安定性試験とMCBとの直接比較が求められます。使用される試験には、サザンブロッティング、mRNAシーケンシング、またはトランスジーンコピー数などの技術を用いたトランスジーンの遺伝子解析が含まれます。潜在的なコンタミネーションの検査には、微生物（無菌性およびマイコプラズマ）、外来ウイルス（in vitroおよびin vivo、透過型電子顕微鏡検査）、特定ウイルス検査など、プロセスに応じて決定される様々な方法が用いられます。

異なる種由来のEoPBCを特性解析するために用いられる試験方法には、以下のものが含まれます：

• 無菌試験
• マイコプラズマ試験
• 生体内試験
• in vitro試験
• レトロウイルス試験
• ウシおよびブタを用いたアッセイ
• 電子顕微鏡検査
• 種特異的アッセイ

ザルトリウス社が提供する遺伝的安定性アッセイには、以下のものが含まれます：

• 核酸配列決定
• サザンブロット
• アイデンティティー試験
• 遺伝子コピー数